PCR实验室建立方法
1、建立样品准备区
这个区域专门用作样品的准备,在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施:⑴PCR产物和带有要扩增序列的DNA克1隆不能在这个房间操作。⑵组织培养物、组织标本和血1清样品都带进样品准备间处理,以根据应用的需要提取DNA或RNA。⑶用于样品处理的工具不能被用作普通分子克1隆的工具,也不能用作操作靶序列。⑷DNA样品应该用有专门的防护或正压活塞式移液管操作,净化车间工程,以防止在吸取样品时有气溶胶遗留。⑸大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。⑹管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生,而且管子不能用力崩开,武汉净化车间,这样会产生气溶胶。⑺任何时候都应该穿实验服和带手套,手套要经常更换,尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间,经常清洗。
PCR实验室由缓冲区及四个单独的工作区域
缓冲区、试剂储存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂储存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。
PCR实验室空调通风系统设计及压力控制
PCR实验室关键控制好各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。要严格控制送、排风的比例以保住各实验区的阶梯式压力要求及达到安全排放标准。
3、微生物检测洁净室一般面积都不大,在未采用中央空调调节气温的情况下,只能用柜式空调控制室内气温,但不能将柜机直接安装在洁净实验室内,净化车间设计,因柜机吹出的风会改变洁净的气流流向,破坏洁净度。本次研究、设计、建造的微生物检测洁净室只有60m2,净化车间装修,其中2m2为机房,柜机安装在机房内,新风和回风混合后,由柜机将混合空气制冷或制热后,通过风管送入总风机,再由总风机输送到各洁净室,室内空气在45~30min均达到控制温度的要求,同时不破坏气流的流向。
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